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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拟南芥EMS突变体
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Z&D

铁虫 (小有名气)

[求助] 拟南芥EMS突变体 已有1人参与

大家好，导师要求做拟南芥EMS突变体，但我不知如何下手，具体的流程是什么尼？还请各位多多指教，小女子感激不尽！！
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未来的我一定会感谢现在拼命的自己！
1楼 2017-07-10 15:09:15
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
https://wk.baidu.com/view/d949d24ae2bd960591c67708

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2楼2017-07-11 06:28:34
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+5, 鼓励热心回帖交流 2017-09-02 22:32:22
1、EMS诱变拟南芥 诱变方法：
称取250mg(约5000粒)野生型种子+25ml重蒸水 →50ml烧杯内搅拌30min→4℃下放置12h→30ml 100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)的100ml三角瓶中 →加入0.2%(v/v)的甲基磺酸乙酯(EMS)→封口后 放在水浴(25℃)振荡器上振荡12h→50ml蒸馏水 漂洗种子4次,每次15min→将漂洗好的种子置4℃ 下春化3天后种植。

2、 诱变植株培养：
将经EMS诱变处理后的拟南芥种子(M1)播 种于用1 /4Hoagland营养液浸透的混有蛭石 的营养土中(营养土:蛭石=2:1, v/v),种植后 覆盖塑料薄膜以保持湿度。

3、 突变体筛选：
根据光合色素的改变来筛选叶色突变体 因为很多与光合作用相关的基因突变,会直接引 起叶片颜色的改变。叶色变异是比较常见的突 变性状,一般在苗期表达,但少数突变体直到发 育后期才发生叶色突变。由于基因突变往往是 直接或间接影响叶绿素的合成和降解,改变叶绿 素含量和叶绿素a/b的比值,所以叶色突变体也 多为叶绿素突变体。叶色突变体的分类主要从 苗期叶色来划分,如白化、黄化、浅色、黄绿、 绿色、花斑叶。
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及时行乐，人生不留遗憾！
3楼2017-07-11 08:19:21
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123BIOCAT

铁虫 (著名写手)
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-09-02 22:32:48
EMS（甲基磺酸乙酯）诱变方法：
称取250mg(约5000粒)野生型种子+25ml重蒸水 →50ml烧杯内搅拌30min→4℃下放置12h→30ml 100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)的100ml三角瓶中 →加入0.2%(v/v)的甲基磺酸乙酯(EMS)→封口后 放在水浴(25℃)振荡器上振荡12h→50ml蒸馏水 漂洗种子4次,每次15min→将漂洗好的种子置4℃ 下春化2-3天后种植。
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4楼2017-07-19 17:57:56
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Z&D

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 123BIOCAT at 2017-07-19 17:57:56
EMS（甲基磺酸乙酯）诱变方法：
称取250mg(约5000粒)野生型种子+25ml重蒸水 →50ml烧杯内搅拌30min→4℃下放置12h→30ml 100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)的100ml三角瓶中 →加入0.2%(v/v)的甲基磺酸乙酯(EMS)→封口后 ...

谢谢

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未来的我一定会感谢现在拼命的自己！
5楼2017-09-02 15:26:34
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Z&D

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-07-11 08:19:21
1、EMS诱变拟南芥 诱变方法：
称取250mg(约5000粒)野生型种子+25ml重蒸水 →50ml烧杯内搅拌30min→4℃下放置12h→30ml 100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.5)的100ml三角瓶中 →加入0.2%(v/v)的甲基磺酸乙酯(EMS)→封口后 放 ...

谢谢

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未来的我一定会感谢现在拼命的自己！
6楼2017-09-02 15:26:46
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