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mustdone

金虫 (初入文坛)

[求助] 【UPLC求助】色谱峰一直有问题,希望得到指导 已有1人参与

【UPLC求助】色谱峰一直有问题,希望得到指导

【UPLC求助】色谱峰一直有问题,希望得到指导-1

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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿,月儿,月儿。。。你在哪

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
mustdone: 金币+40, ★★★很有帮助 2017-09-08 23:18:00
UPLC问世的原因是缩短时间,高效分离,你这个时间整这么长,不符合效率的要求。分离度不够的话,更换其他小粒径色谱柱,或者运行梯度,再不行换成长柱在HPLC上分离吧。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

我寄愁心与明月,随君直到夜郎西
2楼2017-07-09 10:14:54
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mustdone

金虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 明月的夜 at 2017-07-09 10:14:54
UPLC问世的原因是缩短时间,高效分离,你这个时间整这么长,不符合效率的要求。分离度不够的话,更换其他小粒径色谱柱,或者运行梯度,再不行换成长柱在HPLC上分离吧。

运行梯度改了也没有效果,小粒径色谱柱是指?现在用的是waters的BEH C18色谱住……
3楼2017-07-09 11:40:54
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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿,月儿,月儿。。。你在哪

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mustdone(卓越_先锋代发): 金币+20, 谢谢O(≧▽≦)O 2017-07-09 15:59:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-09 11:40:54
运行梯度改了也没有效果,小粒径色谱柱是指?现在用的是waters的BEH C18色谱住……...

你用的BEH C18 应该是配的,好像是4.7长度,1.7um的。给你几个建议啊。
1. 有的物质比较难分离, 既然时间延长能分离,就这样吧。这样也挺好的。
2. 更换甲醇为有机相看看
3,其他1.7或3um之类的C18色谱柱。
4. 会不会是你梯度设置的不合理。
我寄愁心与明月,随君直到夜郎西
4楼2017-07-09 12:00:52
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xue小丸子

铁杆木虫 (著名写手)

如果是UPLC的柱子,跑的时间太长了,没必要拉长,主要是看你要哪个峰

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-07-09 17:01:10
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mustdone

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 明月的夜 at 2017-07-09 12:00:52
你用的BEH C18 应该是配的,好像是4.7长度,1.7um的。给你几个建议啊。
1. 有的物质比较难分离, 既然时间延长能分离,就这样吧。这样也挺好的。
2. 更换甲醇为有机相看看
3,其他1.7或3um之类的C18色谱柱。
4 ...

现在就是延长时间也分离不了,前面4-20分钟这一段的小峰,延长时间的话会变得扁平趋近基线,在梯度变化率为0.7-1左右可以比较明显的看到小峰,但是这时候的分离都是达不到要求的;中间20-26分钟的主峰,有一个23分钟出来的夹着的小峰就是分不开,比如在22的乙腈的情况下能出来一个小尖头,走22的等度也就只有一个小尖头,往前尝试18.21,往后尝试24都会和前面的大峰合在一起……现在不知道还能够怎样来优化洗脱程序,达到分离效果了……首先要能全部分离开再说缩短时间吧。甲醇我会试试的,之前用甲醇,可能看起来出峰比较慢,我换甲醇看看。谢谢你的回复。
6楼2017-07-10 18:45:29
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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿,月儿,月儿。。。你在哪

引用回帖:
6楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-10 18:45:29
现在就是延长时间也分离不了,前面4-20分钟这一段的小峰,延长时间的话会变得扁平趋近基线,在梯度变化率为0.7-1左右可以比较明显的看到小峰,但是这时候的分离都是达不到要求的;中间20-26分钟的主峰,有一个23分 ...

那我建议你换HPLC,用长柱试试吧
我寄愁心与明月,随君直到夜郎西
7楼2017-07-10 18:46:26
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mustdone

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xue小丸子 at 2017-07-09 17:01:10
如果是UPLC的柱子,跑的时间太长了,没必要拉长,主要是看你要哪个峰

做指纹图谱……应该事尽量要分开,然后峰尽量多的吧……
8楼2017-07-10 18:46:49
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xue小丸子

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-10 18:46:49
做指纹图谱……应该事尽量要分开,然后峰尽量多的吧……...

指纹图谱我们一般是用hplc的柱子,uplc的话会接质谱,用总离子流图去做指纹图谱

发自小木虫IOS客户端
9楼2017-07-10 23:59:26
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