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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【UPLC求助】色谱峰一直有问题，希望得到指导
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mustdone

金虫 (初入文坛)

[求助] 【UPLC求助】色谱峰一直有问题，希望得到指导 已有1人参与

【UPLC求助】色谱峰一直有问题，希望得到指导

【UPLC求助】色谱峰一直有问题，希望得到指导-1

【UPLC求助】色谱峰一直有问题，希望得到指导-2
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1楼 2017-07-09 09:22:49
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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿，月儿，月儿。。。你在哪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mustdone: 金币+40, ★★★很有帮助 2017-09-08 23:18:00
UPLC问世的原因是缩短时间，高效分离，你这个时间整这么长，不符合效率的要求。分离度不够的话，更换其他小粒径色谱柱，或者运行梯度，再不行换成长柱在HPLC上分离吧。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

mustdone
我寄愁心与明月，随君直到夜郎西
2楼2017-07-09 10:14:54
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mustdone

金虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 明月的夜 at 2017-07-09 10:14:54
UPLC问世的原因是缩短时间，高效分离，你这个时间整这么长，不符合效率的要求。分离度不够的话，更换其他小粒径色谱柱，或者运行梯度，再不行换成长柱在HPLC上分离吧。

运行梯度改了也没有效果，小粒径色谱柱是指？现在用的是waters的BEH C18色谱住……
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3楼2017-07-09 11:40:54
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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿，月儿，月儿。。。你在哪
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mustdone(卓越_先锋代发): 金币+20, 谢谢Ｏ(≧▽≦)Ｏ 2017-07-09 15:59:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-09 11:40:54
运行梯度改了也没有效果，小粒径色谱柱是指？现在用的是waters的BEH C18色谱住……...

你用的BEH C18 应该是配的，好像是4.7长度，1.7um的。给你几个建议啊。
1. 有的物质比较难分离， 既然时间延长能分离，就这样吧。这样也挺好的。
2. 更换甲醇为有机相看看
3，其他1.7或3um之类的C18色谱柱。
4. 会不会是你梯度设置的不合理。
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我寄愁心与明月，随君直到夜郎西
4楼2017-07-09 12:00:52
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xue小丸子

铁杆木虫 (著名写手)
如果是UPLC的柱子，跑的时间太长了，没必要拉长，主要是看你要哪个峰

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5楼2017-07-09 17:01:10
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mustdone

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 明月的夜 at 2017-07-09 12:00:52
你用的BEH C18 应该是配的，好像是4.7长度，1.7um的。给你几个建议啊。
1. 有的物质比较难分离， 既然时间延长能分离，就这样吧。这样也挺好的。
2. 更换甲醇为有机相看看
3，其他1.7或3um之类的C18色谱柱。
4 ...

现在就是延长时间也分离不了，前面4-20分钟这一段的小峰，延长时间的话会变得扁平趋近基线，在梯度变化率为0.7-1左右可以比较明显的看到小峰，但是这时候的分离都是达不到要求的；中间20-26分钟的主峰，有一个23分钟出来的夹着的小峰就是分不开，比如在22的乙腈的情况下能出来一个小尖头，走22的等度也就只有一个小尖头，往前尝试18.21，往后尝试24都会和前面的大峰合在一起……现在不知道还能够怎样来优化洗脱程序，达到分离效果了……首先要能全部分离开再说缩短时间吧。甲醇我会试试的，之前用甲醇，可能看起来出峰比较慢，我换甲醇看看。谢谢你的回复。
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6楼2017-07-10 18:45:29
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明月的夜

木虫之王 (文坛精英)

月儿，月儿，月儿。。。你在哪
引用回帖:
6楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-10 18:45:29
现在就是延长时间也分离不了，前面4-20分钟这一段的小峰，延长时间的话会变得扁平趋近基线，在梯度变化率为0.7-1左右可以比较明显的看到小峰，但是这时候的分离都是达不到要求的；中间20-26分钟的主峰，有一个23分 ...

那我建议你换HPLC，用长柱试试吧
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我寄愁心与明月，随君直到夜郎西
7楼2017-07-10 18:46:26
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mustdone

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xue小丸子 at 2017-07-09 17:01:10
如果是UPLC的柱子，跑的时间太长了，没必要拉长，主要是看你要哪个峰

做指纹图谱……应该事尽量要分开，然后峰尽量多的吧……
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8楼2017-07-10 18:46:49
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xue小丸子

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by mustdone at 2017-07-10 18:46:49
做指纹图谱……应该事尽量要分开，然后峰尽量多的吧……...

指纹图谱我们一般是用hplc的柱子，uplc的话会接质谱，用总离子流图去做指纹图谱

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9楼2017-07-10 23:59:26
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