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大片段DNA酶切连接效率怎么提高 已有2人参与
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| 求助!!!构建文库时,单酶切的基因组DNA,用T4连接酶连接时,小片段DNA(<50Kb)连接效率很高,每2ul连接产物可达到5000个以上的单克隆,但是大片段DNA(~80Kb)连接效率很低,每2ul连接产物只有到600左右的单克隆,都进行了脱盐处理,也尝试了目的片段与载体的多种比例,都不能达到高效率,为什么?怎么提高大片段的连接效率? |
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