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TA克隆连接方向问题，实验室小白，求大神们指教！ 已有4人参与
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TA连接方向问题。我用pMD19T simple 和带有BamH1和Hind3的PCR产物链接，怎么验证它的连接方向呢？ 我接下来要连接到pET-32a 上表达，已经确定用这两个酶切位点可以正向连在pET-32a上了，还需要验证PCR产物在克隆载体上的方向吗？ @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端 |
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MulanQahar
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用双酶切的时候，一般不会有这种情况。但是常常有很多的意外发生。比如mutation. 还有就是，你的pcr 产物或许有问题的情况也都有。因为pcr的时候，能读的长度是有限的。 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-06-09 10:38:47
2楼2017-06-09 09:53:54
3楼2017-06-09 09:54:27
MulanQahar
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第一种方法，Sequencing. 第二种是，找一个离bamh 1 或 离hind3 近的digestion site. 然后用双酶切 发自小木虫Android客户端 |
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4楼2017-06-09 10:03:36