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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » TA克隆连接方向问题，实验室小白，求大神们指教！
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linhanmm

新虫 (初入文坛)

[求助] TA克隆连接方向问题，实验室小白，求大神们指教！ 已有4人参与

TA连接方向问题。我用pMD19T simple 和带有BamH1和Hind3的PCR产物链接，怎么验证它的连接方向呢？   我接下来要连接到pET-32a 上表达，已经确定用这两个酶切位点可以正向连在pET-32a上了，还需要验证PCR产物在克隆载体上的方向吗？

@youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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linhanmm

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1楼 2017-06-09 09:23:46
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linhanmm

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by MulanQahar at 2017-06-09 10:03:36
第一种方法，Sequencing. 第二种是，找一个离bamh 1 或 离hind3 近的digestion site. 然后用双酶切

Simple 载体上没有酶切位点的～测序的话也想过，不过需要花钱，如果实在是没办法也就只能测序了～

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5楼2017-06-09 10:08:26
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linhanmm

新虫 (初入文坛)
送红花一朵


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2楼2017-06-09 09:53:54
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linhanmm

新虫 (初入文坛)
别沉啊，求大神们指教啊！送红花～给金币哦！

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3楼2017-06-09 09:54:27
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MulanQahar

金虫 (正式写手)
第一种方法，Sequencing. 第二种是，找一个离bamh 1 或 离hind3 近的digestion site. 然后用双酶切

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linhanmm
4楼2017-06-09 10:03:36
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