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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 提取RNA反转录成cDNA之后需要测浓度吗
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wu27dh

金虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA反转录成cDNA之后需要测浓度吗 已有1人参与

在提RNA反转录之前需要测RNA的浓度，然后定量再反转录成cDNA，反转录过程不同的样会有差异吗？我拿稀释十倍的cDNA用actin跑PCR之后再跑琼脂糖电泳，跑出来的条带都很亮，但是稀释15倍之后明暗差异就很大，按理说不同的样的actin的表达量应该是一样的，这样的cDNA可以用吗？还是需要再测一下cDNA的浓度再定量呢？
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1楼 2017-06-08 10:13:12
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不需要测定cDNA浓度，测不准
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2楼2017-06-08 15:19:34
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颜紫星

新虫 (著名写手)
同意楼上观点

发自小木虫Android客户端
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3楼2017-06-08 17:35:33
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wu27dh

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2017-06-08 15:19:34
不需要测定cDNA浓度，测不准

但是琼脂糖电泳跑出来有的暗有的亮，是不是跑qrtPCR的时候反正有内参，上样量也不需要一样呀？
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4楼2017-06-08 18:03:15
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cvtgh269
5楼2017-08-17 20:02:13
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mkyep91
6楼2017-08-19 00:12:28
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cvtgh269
7楼2017-08-19 07:35:23
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cynay57
8楼2017-08-19 18:11:12
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