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wu27dh

金虫 (初入文坛)

[求助] 提取RNA反转录成cDNA之后需要测浓度吗 已有1人参与

在提RNA反转录之前需要测RNA的浓度,然后定量再反转录成cDNA,反转录过程不同的样会有差异吗?我拿稀释十倍的cDNA用actin跑PCR之后再跑琼脂糖电泳,跑出来的条带都很亮,但是稀释15倍之后明暗差异就很大,按理说不同的样的actin的表达量应该是一样的,这样的cDNA可以用吗?还是需要再测一下cDNA的浓度再定量呢?
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颜紫星

新虫 (著名写手)

3楼2017-06-08 17:35:33
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不需要测定cDNA浓度,测不准
2楼2017-06-08 15:19:34
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wu27dh

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2017-06-08 15:19:34
不需要测定cDNA浓度,测不准

但是琼脂糖电泳跑出来有的暗有的亮,是不是跑qrtPCR的时候反正有内参,上样量也不需要一样呀?
4楼2017-06-08 18:03:15
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