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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 胶跑不好，求大神帮助
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小宇爱学习?

新虫 (初入文坛)

[交流] 胶跑不好，求大神帮助 已有6人参与

我提了一次RNA,跑了电泳，如图一;
接着反转录成cDNA,跑PCR,又跑了电泳，如图二，没p出来，maker也很模糊，不知道哪里出了问题呀？求大神帮助

胶跑不好，求大神帮助


胶跑不好，求大神帮助-1


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1楼 2017-06-06 15:58:01
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伤何处

木虫 (正式写手)
★
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首先确定你的电泳液有没有问题，然后就是你的染料有没有问题。
我之前也跑出这样的，后面换了染料就解决了
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对也罢，错也罢；正也罢，逆也罢；通途也好，崎岖无妨……但问，吾心坚否？若坚，纵使歧路，以铁心，贯穿而过，亦为大道！不坚，便是坦途，也难登临绝顶，观险峰
2楼2017-06-06 22:14:51
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矮腿妹的烦恼

新虫 (初入文坛)
★
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提的RNA应该没问题，可能后面出了问题

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3楼2017-06-06 23:53:24
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stabilized

银虫 (小有名气)
★
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Marker有问题，胶出问题的可能性大。
胶要融化充分，肉眼看着非常均匀。凝固也要充分，30min以上。
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坚持！
4楼2017-06-07 08:53:36
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cxh90

新虫 (著名写手)
换引物再p

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5楼2017-06-09 07:48:13
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宁文峰

新虫 (小有名气)
★
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rna没问题，像是用盒子提的，没有5.8s，虽说有一些降解，但不影响反转录，结果pcr没跑出来，要考虑几个问题:1解决为什么marker模糊，是降解还是染料或者tae问题，2pcr引物是否有问题或者说其他体系中的试剂是否有问题，3反转录体系或者目的rna有没有高级结构，导致反转录失败，4最基本的，整个过程中的降解问题，包括cdna

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所追求的不在明天，而在现在以前
6楼2017-06-09 21:47:20
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花花贝

金虫 (知名作家)
★
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1.胶浓度不对。2.梳子大小不对。3.缓冲液加的过多，没过胶即可。4.电压不对。

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7楼2017-06-09 21:59:37
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