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小宇爱学习?

新虫 (初入文坛)

[交流] 胶跑不好,求大神帮助 已有6人参与

我提了一次RNA,跑了电泳,如图一;
接着反转录成cDNA,跑PCR,又跑了电泳,如图二,没p出来,maker也很模糊,不知道哪里出了问题呀?求大神帮助

胶跑不好,求大神帮助


胶跑不好,求大神帮助-1


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伤何处

木虫 (正式写手)


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首先确定你的电泳液有没有问题,然后就是你的染料有没有问题。
我之前也跑出这样的,后面换了染料就解决了
对也罢,错也罢;正也罢,逆也罢;通途也好,崎岖无妨……但问,吾心坚否?若坚,纵使歧路,以铁心,贯穿而过,亦为大道!不坚,便是坦途,也难登临绝顶,观险峰
2楼2017-06-06 22:14:51
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矮腿妹的烦恼

新虫 (初入文坛)


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提的RNA应该没问题,可能后面出了问题

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3楼2017-06-06 23:53:24
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stabilized

银虫 (小有名气)


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Marker有问题,胶出问题的可能性大。
胶要融化充分,肉眼看着非常均匀。凝固也要充分,30min以上。
坚持!
4楼2017-06-07 08:53:36
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cxh90

新虫 (著名写手)

5楼2017-06-09 07:48:13
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宁文峰

新虫 (小有名气)


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rna没问题,像是用盒子提的,没有5.8s,虽说有一些降解,但不影响反转录,结果pcr没跑出来,要考虑几个问题:1解决为什么marker模糊,是降解还是染料或者tae问题,2pcr引物是否有问题或者说其他体系中的试剂是否有问题,3反转录体系或者目的rna有没有高级结构,导致反转录失败,4最基本的,整个过程中的降解问题,包括cdna

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所追求的不在明天,而在现在以前
6楼2017-06-09 21:47:20
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花花贝

金虫 (知名作家)


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1.胶浓度不对。2.梳子大小不对。3.缓冲液加的过多,没过胶即可。4.电压不对。

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7楼2017-06-09 21:59:37
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