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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相冲洗柱子问题
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硫元素

铁虫 (小有名气)

[求助] 液相冲洗柱子问题 已有3人参与

各位大神好，我想问一下，用NH4Ac水溶液和NH4Ac乙腈作流动相（分析样品走梯度，开始比例为50:50），分析样品完之后用90:10水：乙腈冲洗柱子30min，然后用50:50乙腈：水再冲洗时，为什么柱压会更加高呢？基本都有300多Bar以上了。。。柱子是安捷伦Z0RBAX Eclipse XDB-C18柱。
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1楼 2017-05-26 20:30:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuliu1133

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
流速多少，柱子内径和长度多少？90% 水到50%水确实是有一个压力先增大后减小的过程。可以考虑接两通，看看压力多少。排除一下是柱子堵了还是液相有问题。
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2楼2017-05-27 09:04:43
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
50比50的有机相和水混合是压力最高的时候，只要压力在可控范围内，这个是正常的
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7楼2017-05-28 08:06:58
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小白丨

新虫 (初入文坛)
确实会压力变大，不过应该是慢慢变大的，因为乙腈比例变大了

发自小木虫IOS客户端
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3楼2017-05-27 19:25:12
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mozart13

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是缓冲盐没有冲洗干净 确保用90%H2O冲洗10-20个柱体积
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Live, Laugh, Love!
6楼2017-05-28 00:28:01
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liuliu1133

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 硫元素 at 2017-05-27 21:44:27
流速才0.3，请问这个原理是什么呢？...

你这个是UPLC 吗 柱子内径是1.7 的那种。如果是这样的话，那就300bar 差不多，没问题。不要有压力。
但是，如果不是，你就要排查了。。。。。
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8楼2017-05-31 09:32:21
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longshuo93

银虫 (小有名气)
50%比例的时候黏度最大 所以压力最大

发自小木虫IOS客户端
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10楼2017-05-31 10:08:53
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普通回帖

硫元素

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuliu1133 at 2017-05-27 09:04:43
流速多少，柱子内径和长度多少？90% 水到50%水确实是有一个压力先增大后减小的过程。可以考虑接两通，看看压力多少。排除一下是柱子堵了还是液相有问题。

流速才0.3，请问这个原理是什么呢？
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4楼2017-05-27 21:44:27
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硫元素

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小白丨 at 2017-05-27 19:25:12
确实会压力变大，不过应该是慢慢变大的，因为乙腈比例变大了

有机相的引入不应该会是压力下降的吗
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5楼2017-05-27 21:49:27
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

哥们，你这个帖子发过一次的吧，50:50乙腈水，是色谱柱压力最高的比例，没超出柱耐压都是正常的。用到缓冲盐流动相，你的清洗时间比例明显不够，建议高比例水相冲的时间再长一些。另外，仪器可以用热水冲洗，泵那块也会有盐沉积。
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9楼2017-05-31 09:41:25
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