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花梨杨过

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序失败 已有4人参与

构建质粒时转化平板上菌特别多,密密麻麻,用转化片段内部的引物pcr验证正确,但送往公司测序失败,请问应该怎么决

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丽姐萍妹

新虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-23 07:40:39
我们一般都是引物交叉跑才比较靠谱 还有就是测序公司呢?有没有问题 送测序的有几个菌?

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2楼2017-05-22 23:06:19
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perfect1020

新虫 (初入文坛)

楼主解决了吗?我也遇到了同样的问题,同求!

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3楼2017-05-23 00:18:10
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-23 07:40:54
你用酶切的方法验证看看呢,菌液检测的时候记得加阳性和阴性对照

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竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
4楼2017-05-23 02:05:12
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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测序失败是什么意思,没有测出来还是测序结果和标准序列对比失败
想做一位科研好人
5楼2017-05-23 09:44:16
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花梨杨过

新虫 (初入文坛)

6楼2017-05-23 14:37:16
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bbass533

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

7楼2017-05-23 15:04:25
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zhang0402xin

铁虫 (初入文坛)

最近刚送的测序也是失败,公司解释说pcr扩增时是单引物作用的.....
8楼2017-05-23 18:13:33
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默丨丨念丶

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

问下公司客服,可以纯化下、重新制样品。很多情况的,
9楼2017-05-26 11:16:03
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sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-26 16:11:58
有时候就是测不出来,跟很多因素有关,你可以再将这个克隆转化一下,重新挑菌,重新提质粒,送测序
很给力
10楼2017-05-26 11:44:00
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