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wmwman306

禁虫 (著名写手)

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[交流] SDS—PAGE电泳（蛋白电泳）【有效期至2009年1月11日】

有谁做蛋白分析啊

我的蛋白电泳出了问题:为什么跑到最后是锯齿状呢？已经重复好多次了。

我自己做了好几方面的改进，胶溶液重配了好几次，还是那样。可能是哪方面的原因了，愁死人了。

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1楼 2009-01-09 15:35:08

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fjc100648

金虫 (小有名气)

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★ ★ ★ ★ ★
wmwman306(金币+5,VIP+0):谢谢！ 2-18 17:03

最可能的原因是样品中有不溶的颗粒。建议离心后再取上清上样。另一种可能是胶凝固的不均匀。

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2楼2009-01-17 13:58:05

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z8t8t8

金虫 (小有名气)

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★
wmwman306(金币+1,VIP+0):谢谢！ 2-18 17:04

胶凝固的不均匀

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曾經の有個ヅ小釹孩~跑到ωǒ面前对ωǒ说：メ_哥哥,?煤盟禶``ωǒ上去就是两巴掌：ツ废话！

3楼2009-01-17 14:28:11

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181805776

铁虫 (正式写手)

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电泳的历史和美国的历史相当，约有200年，蛋白质电泳也有100年的历史。1937年瑞典的Tiselius因对电泳定量方面的贡献而获得诺贝尔奖。以后琼脂电泳和纸电泳技术进一步发展，并与医学广泛结合。在20世纪60年代凝胶电泳的兴起，树立了电泳史上的一个里程碑，蛋白质电泳普及到生物学和医学的大部分实验室。30年前，现代双向电泳的出现，奠定了目前蓬勃发展的蛋白质组学的基础；15年前，商品化的毛细管电泳突飞猛进的发展，使电泳操作实现了自动化。

电泳对仪器设备要求不高，目前可算是已经进入千家万户。尤其是现在生物学和医学实验室中应用最普及的凝胶电泳，即使在同一实验室中，不同工作者的操作程序也可能不同。看上去，一些习惯性的细微差别对分离图谱影响不大，导致我们放松了对细节的重视。很多人认为电泳是一门技术，满足于能用就行，忽视了理论方面的重要性，以至于难以提高。经验固然重要，它是一种“量”的积累；而电泳受很多因素影响，如果一些基本概念清楚，能在脑海中经常思索和融会贯通，那么就有可能抓住一瞬间出现的灵感和火花，使你的实验出现一个“质”的飞跃！

美国Diddings研究了一种新型电泳，它是在正极和负极之间加上磁场，或者是利用高温和低温来分离蛋白质或带电胶体粒子，发表在1993年的“Science”上。后来虽然没有能形成一项能普及和广泛应用的技术，但它确是很有新意和原创性的工作。

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4楼2009-01-17 18:34:45

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景魏晋

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wmwman306(金币+1,VIP+0):谢谢！ 2-18 17:05

不均匀

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努力

5楼2009-01-17 18:42:33

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yinfengzhizi

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wmwman306(金币+7,VIP+0):非常感谢！ 2-18 17:04

首先考虑是凝胶不均匀，各成分加入后，要尽量混匀再灌胶。另外要延长凝胶时间，待胶充分凝固再做后续实验
第二，上样的样品，是否充分溶解，是否上样太急，有不溶性颗粒存在。
第三，缓冲液的PH，换用其它实验室的缓冲液试一下
暂时能想到这么多，如果还不行，建议你把你的试验步骤写出来，看一下是不是其它地方出了问题。

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6楼2009-01-20 10:30:17

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jiaminl

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wmwman306(金币+1,VIP+0):谢谢！ 2-18 17:05

很可能是胶不均一

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Nevergiveup!

7楼2009-01-20 10:54:11

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