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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于pPIC9K载体克隆遇到的问题
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铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近要做这个，质粒能不能给我点呀

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41楼2017-06-02 22:16:58
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铭记于心2222

铜虫 (初入文坛)
连接体系有问题嘛？片段有多大？载体很大不好转化很正常.确保酶切，质粒去磷酸化，再试试

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42楼2017-06-02 22:24:49
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uunpyqs624
43楼2017-08-20 02:05:11
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-17 08:43:16
跑电泳，起码质粒的形态不同了，成了条带状，而且用的是taraka的内切酶，不知我这样判断对不对？
...

你的原始质粒未酶切的时候，电泳条带在10000以上？酶切之后还在10000以上吗？
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44楼2018-01-27 21:39:51
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匿名

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45楼2018-01-27 23:44:06
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遊俠

新虫 (小有名气)
不清楚你的具体操作，但感觉是双酶切这块儿有问题。如果可以的话，可以扩增载体，省去酶切这部分，然后直接同源重组的方法，构建这个载体，在做转化。

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46楼2018-01-28 11:44:29
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