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匿名

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11楼2017-05-18 13:25:46

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

引用回帖:

7楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-17 21:15:56
EcoRI NotI
...

把载体和目的基因寄给我，5000块半个月帮你做出来

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12楼2017-05-18 14:23:52

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【答案】应助回帖

引用回帖:

11楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-18 13:25:46
我之前也做过其他载体的克隆，相关的过程也都差不多做的，所有的步骤都重新来过了，连感受态都重新做了一批，但是还是不行。用了Takara的连接试剂盒，这个和我之前单独用的T4不同，其他也都一样的。真是觉得很是头 ...

在大肠杆菌中克隆不是很难

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13楼2017-05-18 14:25:04

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11楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-18 13:25:46
我之前也做过其他载体的克隆，相关的过程也都差不多做的，所有的步骤都重新来过了，连感受态都重新做了一批，但是还是不行。用了Takara的连接试剂盒，这个和我之前单独用的T4不同，其他也都一样的。真是觉得很是头 ...

你这两个酶我没有

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14楼2017-05-18 14:27:08

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7楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-17 21:15:56
EcoRI NotI
...

你用的那两个酶我没有

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15楼2017-05-18 14:32:02

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【答案】应助回帖

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11楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-18 13:25:46
我之前也做过其他载体的克隆，相关的过程也都差不多做的，所有的步骤都重新来过了，连感受态都重新做了一批，但是还是不行。用了Takara的连接试剂盒，这个和我之前单独用的T4不同，其他也都一样的。真是觉得很是头 ...

连接酶用什么应该问题都不大，拿一个以前的质粒做个转化涂个板看看。

想做一位科研好人

16楼2017-05-18 15:14:07

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17楼2017-05-18 15:51:16

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17楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-18 15:51:16
已经做过了～空质粒能长起来
...

那就是质粒本身了，向有关公司技术咨询一下吧

想做一位科研好人

18楼2017-05-18 15:54:33

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19楼2017-05-18 17:21:31

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胶回收后的浓度很重要，我之前就是浓度低连不上

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20楼2017-05-19 20:09:29

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