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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于pPIC9K载体克隆遇到的问题
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匿名

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1楼 2017-05-16 15:44:18
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贱贱JMe

木虫 (小有名气)

教导主任

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-18 13:25:46
我之前也做过其他载体的克隆，相关的过程也都差不多做的，所有的步骤都重新来过了，连感受态都重新做了一批，但是还是不行。用了Takara的连接试剂盒，这个和我之前单独用的T4不同，其他也都一样的。真是觉得很是头 ...

连接酶用什么应该问题都不大，拿一个以前的质粒做个转化涂个板看看。
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想做一位科研好人
16楼2017-05-18 15:14:07
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781055707

木虫 (著名写手)
你是怎么确定酶就一定把你的目的基因给切开的那？
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2017-05-17 08:07:59
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匿名

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3楼2017-05-17 08:43:16
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781055707

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by guoxhyy at 2017-05-17 08:43:16
跑电泳，起码质粒的形态不同了，成了条带状，而且用的是taraka的内切酶，不知我这样判断对不对？
...

不是质粒，是PCR产物的目的片段。
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2017-05-17 09:49:06
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