24小时热门版块排行榜    

查看: 952  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

MarchZR

银虫 (小有名气)

[求助] 请问G418为什么要做预实验最佳杀伤浓度确定? 已有2人参与

没做过这个实验,知道要做预实验确定最佳杀伤浓度,但是不知道为什么?
是这样吗  确定了最佳杀伤浓度之后,在目的基因转染到细胞后,判断是否转染到细胞的染色体基因上了,第一次用这个浓度的抗生素加到细胞中(不做预实验,不知道浓度从哪入手),因为转进去的质粒已经含有了抗性,所以细胞不会死亡,会继续生长,以此来筛选阳性克隆,是这个意思不?如果细胞死了,就是不能一上来加的浓度就把细胞直接都杀死,所以要做预实验。。。?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不同细胞对G418的敏感程度不一样,还是需要你做个简单的梯度浓度确认一下的,就是在参考浓度上下2-3倍梯度 稀释几个浓度点,确认能够100%杀死未转染细胞的浓度
4楼2017-05-10 11:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
MarchZR: 金币+30, ★★★很有帮助, thanks~ 2017-05-18 13:36:42
G418是用来筛选外源基因是否成功转染细胞的一种方法,先拿普通细胞用不同浓度的G418来做梯度筛选,确认能使细胞致死的最小浓度后再来筛选你的转染细胞,如果细胞不死 代表转染外源基因成功,你理解的对
2楼2017-05-09 11:00:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度的确定 需要参考相关文献
3楼2017-05-09 11:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 yunziaaaaa 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:45 by 王兆江
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +3 NSFC2026我来了 2026-02-28 3/150 2026-03-01 21:41 by autumntian
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +3 wsl111 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:38 by ms629
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +3 YXCT 2026-03-01 3/150 2026-03-01 19:51 by 无懈可击111
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +5 礼堂丁真258 2026-02-28 7/350 2026-03-01 19:12 by Js512888
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[基金申请] 刚录用,没有期刊号,但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见