24小时热门版块排行榜    

查看: 960  |  回复: 3

MarchZR

银虫 (小有名气)

[求助] 请问G418为什么要做预实验最佳杀伤浓度确定? 已有2人参与

没做过这个实验,知道要做预实验确定最佳杀伤浓度,但是不知道为什么?
是这样吗  确定了最佳杀伤浓度之后,在目的基因转染到细胞后,判断是否转染到细胞的染色体基因上了,第一次用这个浓度的抗生素加到细胞中(不做预实验,不知道浓度从哪入手),因为转进去的质粒已经含有了抗性,所以细胞不会死亡,会继续生长,以此来筛选阳性克隆,是这个意思不?如果细胞死了,就是不能一上来加的浓度就把细胞直接都杀死,所以要做预实验。。。?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
MarchZR: 金币+30, ★★★很有帮助, thanks~ 2017-05-18 13:36:42
G418是用来筛选外源基因是否成功转染细胞的一种方法,先拿普通细胞用不同浓度的G418来做梯度筛选,确认能使细胞致死的最小浓度后再来筛选你的转染细胞,如果细胞不死 代表转染外源基因成功,你理解的对
2楼2017-05-09 11:00:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度的确定 需要参考相关文献
3楼2017-05-09 11:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不同细胞对G418的敏感程度不一样,还是需要你做个简单的梯度浓度确认一下的,就是在参考浓度上下2-3倍梯度 稀释几个浓度点,确认能够100%杀死未转染细胞的浓度
4楼2017-05-10 11:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 MarchZR 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-23 3/150 2026-03-24 20:25 by 汪!?!
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 招08考数学 +7 laoshidan 2026-03-20 16/800 2026-03-24 17:52 by 乌拉儿山脉
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 300求调剂,材料科学英一数二 +5 leaflight 2026-03-24 5/250 2026-03-24 16:25 by laoshidan
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
请填处理意见