应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 请问G418为什么要做预实验最佳杀伤浓度确定？
41/1返回列表
查看: 959  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

MarchZR

银虫 (小有名气)

[求助] 请问G418为什么要做预实验最佳杀伤浓度确定？ 已有2人参与

没做过这个实验，知道要做预实验确定最佳杀伤浓度，但是不知道为什么?
是这样吗  确定了最佳杀伤浓度之后，在目的基因转染到细胞后，判断是否转染到细胞的染色体基因上了，第一次用这个浓度的抗生素加到细胞中（不做预实验，不知道浓度从哪入手），因为转进去的质粒已经含有了抗性，所以细胞不会死亡，会继续生长，以此来筛选阳性克隆，是这个意思不？如果细胞死了，就是不能一上来加的浓度就把细胞直接都杀死，所以要做预实验。。。？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-05-08 17:31:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
MarchZR: 金币+30, ★★★很有帮助, thanks~ 2017-05-18 13:36:42
G418是用来筛选外源基因是否成功转染细胞的一种方法，先拿普通细胞用不同浓度的G418来做梯度筛选，确认能使细胞致死的最小浓度后再来筛选你的转染细胞，如果细胞不死 代表转染外源基因成功，你理解的对
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2017-05-09 11:00:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sundan611

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

浓度的确定 需要参考相关文献
赞一下 回复此楼
3楼2017-05-09 11:01:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同细胞对G418的敏感程度不一样，还是需要你做个简单的梯度浓度确认一下的，就是在参考浓度上下2-3倍梯度 稀释几个浓度点，确认能够100%杀死未转染细胞的浓度
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-05-10 11:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 MarchZR 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 总分293求调剂 +3 加一一九 2026-03-25 3/150 2026-03-25 10:49 by JourneyLucky
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap－ 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap－
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭