应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 问个很Low的问题，关于PCR扩展的
121/1返回列表
查看: 2059  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hsnr

木虫 (小有名气)

[交流] 问个很Low的问题，关于PCR扩展的

进行PCR扩增时，需要设计待扩增基因的两条上下游引物，但有两个问题不明白：
    1、由于加入的引物有限，随着扩增出的基因数增加，引物应该不够才是，但实际中并没有发生这种情况，是什么原因？
    2、上下游引物是指同一条链的上下游吗？如果是互补链上的，并不在同一条链上，延伸时怎么终止的？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-05-04 17:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)
★
hsnr(金币+1): 谢谢参与
1引物都是过量的，2前引物其实就是正义链的一段序列，后引物也就是反义链的一段序列，这段序列是与正义链互补的。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2017-05-06 08:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Real000Lee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by hsnr at 2017-05-06 18:20:12
如果是这样，就可能造成扩增出来的片段长度和所需要的不一致？片段有长有短？...

刚开始会，但是之后的PCR过程会以之前的产物为模板，即便是延伸过了，以他为模板复制互补链时引物也只结合在对应位置，久而久之长于目的链的DNA比例会越来越低，由于复制是以指数级增加链的个数，这些到最后基本就可以忽略不计了。你画个图就明白了。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2017-05-07 16:19:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pepsi-zy

新虫 (初入文坛)
★
hsnr(金币+1): 谢谢参与
理论上加入的引物都是够的吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-05-05 22:54:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzzzzzz830

新虫 (初入文坛)
★
hsnr(金币+1): 谢谢参与
来混个金币

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
4楼2017-05-06 01:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsnr

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pepsi-zy at 2017-05-05 22:54:22
理论上加入的引物都是够的吧

由于引物是人工合成的，不可能达到扩增后基因片段的数量吧？
赞一下 回复此楼
5楼2017-05-06 08:11:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dadaoxing

禁虫 (著名写手)
★
hsnr(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
7楼2017-05-06 09:48:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dadaoxing

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2017-05-06 09:49:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Real000Lee

新虫 (初入文坛)
★
hsnr(金币+1): 谢谢参与
大家说过的我就不说了，我解释一下怎么终止延伸的，其实也很简单酶工作也是有效率的，每分钟延伸bp数是相对稳定的，你设置的延伸时间到了，开始下一个循环，温度变高自然就停止了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2017-05-06 17:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsnr

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Real000Lee at 2017-05-06 17:18:16
大家说过的我就不说了，我解释一下怎么终止延伸的，其实也很简单酶工作也是有效率的，每分钟延伸bp数是相对稳定的，你设置的延伸时间到了，开始下一个循环，温度变高自然就停止了
...

如果是这样，就可能造成扩增出来的片段长度和所需要的不一致？片段有长有短？
赞一下 回复此楼
10楼2017-05-06 18:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
xxl520zry2楼
2017-05-04 17:45   回复  
hsnr(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫IOS客户端
beryl622312楼
2018-12-08 11:51   回复  
hsnr(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 hsnr 的主题更新
121/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭