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hsnr

木虫 (小有名气)

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[交流] 问个很Low的问题，关于PCR扩展的

进行PCR扩增时，需要设计待扩增基因的两条上下游引物，但有两个问题不明白：
1、由于加入的引物有限，随着扩增出的基因数增加，引物应该不够才是，但实际中并没有发生这种情况，是什么原因？
2、上下游引物是指同一条链的上下游吗？如果是互补链上的，并不在同一条链上，延伸时怎么终止的？

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1楼2017-05-04 17:06:10

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hsnr

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

9楼: Originally posted by Real000Lee at 2017-05-06 17:18:16
大家说过的我就不说了，我解释一下怎么终止延伸的，其实也很简单酶工作也是有效率的，每分钟延伸bp数是相对稳定的，你设置的延伸时间到了，开始下一个循环，温度变高自然就停止了
...

如果是这样，就可能造成扩增出来的片段长度和所需要的不一致？片段有长有短？