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hsnr

木虫 (小有名气)


[交流] 问个很Low的问题,关于PCR扩展的

进行PCR扩增时,需要设计待扩增基因的两条上下游引物,但有两个问题不明白:
    1、由于加入的引物有限,随着扩增出的基因数增加,引物应该不够才是,但实际中并没有发生这种情况,是什么原因?
    2、上下游引物是指同一条链的上下游吗?如果是互补链上的,并不在同一条链上,延伸时怎么终止的?
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Real000Lee

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
10楼: Originally posted by hsnr at 2017-05-06 18:20:12
如果是这样,就可能造成扩增出来的片段长度和所需要的不一致?片段有长有短?...

刚开始会,但是之后的PCR过程会以之前的产物为模板,即便是延伸过了,以他为模板复制互补链时引物也只结合在对应位置,久而久之长于目的链的DNA比例会越来越低,由于复制是以指数级增加链的个数,这些到最后基本就可以忽略不计了。你画个图就明白了。
11楼2017-05-07 16:19:02
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pepsi-zy

新虫 (初入文坛)



hsnr(金币+1): 谢谢参与
理论上加入的引物都是够的吧

发自小木虫Android客户端
3楼2017-05-05 22:54:22
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zzzzzzz830

新虫 (初入文坛)



hsnr(金币+1): 谢谢参与
来混个金币

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-05-06 01:04:59
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hsnr

木虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by pepsi-zy at 2017-05-05 22:54:22
理论上加入的引物都是够的吧

由于引物是人工合成的,不可能达到扩增后基因片段的数量吧?
5楼2017-05-06 08:11:50
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beryl622312楼
2018-12-08 11:51   回复  
hsnr(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
xxl520zry2楼
2017-05-04 17:45   回复  
hsnr(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫IOS客户端
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