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食品微生物检测 已有1人参与
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我刚刚开始从事食品化验，最近一直在做细菌总数的测定～老是失败，我的方法如下，烦请各位大神不吝赐教！两种检样1.16个培养皿，两个勺子（采样用），一个量筒，两个锥形瓶，在126℃鼓风干燥箱灭菌2小时；2.两份500ml的营养琼脂，两份8个装的移液枪头，三份9ml的盐水（一份空白，两份做1：100，1：1000样品匀液），两份250ml的生理盐水（配1：10样品匀液，方法是25g样品225生理盐水），放入高压灭菌锅，126℃，20分钟取出；3.所有灭完菌的东西，用干燥抹布垫着取出放入无菌室，开启紫外线灯，照射15分钟，30分钟后用75％的酒精喷洒全身跟手然后进去查看生理盐水跟营养琼脂冷却情况，再过一个小时左右感觉生理盐水冷却了，营养琼脂微微有点烫，开始进入配置样品匀液；4.点燃酒精灯，用酒精棉球把手跟工作台消毒，取装平皿的不锈钢罐，在酒精灯上绕一下，然后打开，用记号笔编号，顺序依次是空白到1：1000的，各有一个平行样，然后取移液枪首先吸取无菌生理盐水，做空白，接下来一边配置样品匀液一边往平皿中加入对应稀释度的样品匀液，（这些都是在酒精灯旁，把平皿盖子朝酒精灯的那边打开45°开口加入的液体），然后还是把所有的平皿按照空白到1：1000的顺序摞在一起，打开营养琼脂，在酒精灯旁还是开口冲酒精灯打开45°，加入15ml左右的营养琼脂，轻轻旋转混匀，都加完后观察凝固后四个平皿左右一摞一起翻转，放到36℃，48小时候取出观察～注：我这里做的时候平皿一直都是摞在一起的，不知道污染的话是不是跟这个有关系，而且我是取三个稀释度，之前的上司这样告诉我的～4.关于结果，反正空白一直就是长的，而且是一个长，一个不长，很少两个都长，最近一次是除了空白长了，一个，生下都没长！一开始我是最后做空白，后来，才调整到先做空白！结果还是大同小异；5.我是一起做两个检样，做一个是问题不大，能做明白，可是两个一起就出问题！我是一个产品做完后，然后工作台消毒，手消毒再做另一个，不过1：10的样品匀液是一开始两个一起配好的，一个产品我要做大肠菌群和菌落两个检验，先做的菌落，两个样品下来差不多30分钟，我之前的上司说我可能是时间太长了！还有我这两个检样都是用的同一支移液枪，枪头两份我是分开消毒的，用时才打开。我真的困惑啊！我是上网看视频学的，我写的步骤比较详细，还请各位帮忙分一下！ @xiaoamuchong 发自小木虫IOS客户端 |
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2楼2017-05-02 17:57:22
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谢谢啦！我也考虑过移液枪的问题！也有点担心～至少两个产品也应该是要用两个移液枪啊！可是也我们只有一个移液枪，那个坏啦！你这种方法我还没尝试过，这次试试看！比如我这次做完剩下的琼脂，两种产品各剩一个底了，我可以掺起来，下次再用吗？一份琼脂可以经过高压灭菌几次而不破坏里面的成分啊？ 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-05-03 11:32:05
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