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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 老师您好，做pcr目的基因有缺失，老是p不出来条带，换了好几...
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Rjy123

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师您好，做pcr目的基因有缺失，老是p不出来条带，换了好几... 已有1人参与

老师您好，做pcr目的基因有缺失，老是p不出来条带，换了好几套引物，还是没有目的条带，请老师能给一些相关建议么？

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1楼 2017-04-26 07:46:06
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范威21003

铁杆木虫 (小有名气)
★
Rjy123(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:39:13
如果是知道正常序列，想要看一下目前目的基因的缺失情况，可以选择进行多片段的引物设计，就是将一整段分成几个若干部分，引物设计的时候可以重复100多个bp,然后去测序，

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2楼2017-04-26 07:59:32
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修香恋

铜虫 (小有名气)
是用的基因组为模板，还是cDNA?
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3楼2017-04-26 11:08:39
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bestzdz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
去Blast检测引物的特异性，引物的特异性很关键
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学海无涯，乐在其中；谨言慎行，惜时自勉！
4楼2017-04-26 16:51:26
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Rjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 范威21003 at 2017-04-26 07:59:32
如果是知道正常序列，想要看一下目前目的基因的缺失情况，可以选择进行多片段的引物设计，就是将一整段分成几个若干部分，引物设计的时候可以重复100多个bp,然后去测序，
...

好的，谢谢您！

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5楼2017-04-26 23:59:45
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Rjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 修香恋 at 2017-04-26 11:08:39
是用的基因组为模板，还是cDNA?

您好，我的实验是以基因组为模板。

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6楼2017-04-27 00:00:37
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Rjy123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bestzdz at 2017-04-26 16:51:26
去Blast检测引物的特异性，引物的特异性很关键

好的，谢谢您！

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7楼2017-04-27 00:02:15
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Cruiser肖

金虫 (正式写手)
如果实在有些基因很难构建，买一个质粒便宜的不过几百

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8楼2017-04-27 00:13:11
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