应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » KOD酶扩增很多杂带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
141/2返回列表12下一页
查看: 2230  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

哈哈11111111

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] KOD酶扩增很多杂带 已有1人参与

用的是51-59的温度梯度一种DNA，marker是2k的，目的条带在1600bp，做了很多次总是有三条带，求大神指导啊

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-04-25 10:36:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-26 07:44:22
本帖仅楼主可见
赞一下
3楼2017-04-25 15:53:23
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2017-04-25 15:58:02
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

痞子无敌

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
对。提高退火。然后，其实kod酶好像对引物的特异性不强，所以，可以换个酶试试。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
当你当你的眼睛眯着笑
5楼2017-04-26 01:00:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
本帖仅楼主可见
赞一下
7楼2017-04-26 12:39:10
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
哈哈11111111(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-26 16:36:37
本帖仅楼主可见
赞一下
8楼2017-04-26 12:45:00
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

草溪河

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
主要还是引物特异性吧。如果是克隆某个片段，只要有你的目的条带就行，切下回收测序条带正确就行，不一定非得是单一条带。但是如果是检测或者其他用途除外，主要是看具体目的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2017-04-26 15:32:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

哈哈11111111

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
KOD酶扩增很多杂带

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-04-25 10:38:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈哈11111111

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
3楼: Originally posted by XL_Yang at 2017-04-25 15:53:23
一般这种情况原因有：退火温度低（适当提高退火温度，Tm-5），引物特异性差（检查特异性，重新设计引物），模板被污染（对模板进行电泳检测，更换模板），扩增循环数太多（克隆PCR循环数最好不要超高30），祝你实验 ...

我用的是51到59度梯度，还要提高温度么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-26 10:44:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈哈11111111

版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
7楼: Originally posted by XL_Yang at 2017-04-26 12:39:10
看看你引物的TM 值先，如果是65以上，那你用的退火温度是不是低了！
...

引物单上是51度

发自小木虫Android客户端
回复此楼
9楼2017-04-26 14:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哈哈11111111

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
8楼: Originally posted by XL_Yang at 2017-04-26 12:45:00
看你的电泳图没怎么跑开，但仔细看，也是有主带的。你使用梯度退火，较低温度下，非特异已经开始了，后面再逐步提升温度，非特异还是存在。不要嫌麻烦，多做几次，每次设定一个退火温度，从高往低，你会找到一个合 ...

好的，谢谢啦

发自小木虫Android客户端
回复此楼
10楼2017-04-26 14:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 哈哈11111111 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专业求调剂 +7 月月鸟木 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:36 by wangjy2002
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-04-01 4/200 2026-04-01 11:27 by wangjy2002
[考研] 0703求调剂 +3 zizimo 2026-03-31 3/150 2026-04-01 11:15 by 逆水乘风
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 273求调剂 +14 李芷新1 2026-03-31 14/700 2026-04-01 09:32 by fangnagu
[考研] 调剂申请 +8 张张张张zy 2026-03-31 9/450 2026-04-01 08:29 by zjbkx
[考研] 311（085601）求调剂 +12 liziyeyeye 2026-03-28 13/650 2026-04-01 00:34 by fmesaito
[考研] 复试调剂 +7 双马尾痞老板2 2026-03-31 7/350 2026-03-31 19:49 by Dyhoer
[考研] 336材料求调剂 +10 陈滢莹 2026-03-26 12/600 2026-03-31 17:59 by jp9609
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +20 Mr. Z 2026-03-25 21/1050 2026-03-31 16:53 by Zzxxxs
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +6 Ong3 2026-03-27 6/300 2026-03-31 15:18 by yanflower7133
[考研] 一志愿浙江大学工科动力工程370,数一121,专业课135，现在能去哪里 +3 080700调剂 2026-03-30 4/200 2026-03-31 12:00 by KLMY666
[考研] 083000学硕274求调剂 +12 Li李鱼 2026-03-26 12/600 2026-03-31 10:01 by cal0306
[考研] 求调剂 +10 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 10/500 2026-03-30 18:34 by 544594351
[考研] 311求调剂 +10 lin0039 2026-03-26 10/500 2026-03-30 10:26 by herarysara
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭