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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » WB一直做不出来求教大神啊！！！！！！！
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xiao2189818

金虫 (正式写手)

[交流] WB一直做不出来求教大神啊！！！！！！！ 已有12人参与

求教各位大神
本人做WB好久   
一抗1：500 （2μl） TBST稀释 博士德β-actin  
二抗1：2000 （1μl）TBST稀释 三箭羊抗鼠

上胶80v 下胶120v   转膜40min 200mA
封闭1.5h
一抗过夜 洗三次
二抗2小时 洗三次

每次条件都一样而且我目的条带CYP450s都出来了，反而内参没有出来。很郁闷
大神看看我的条带
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1楼 2017-04-15 17:08:02
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xiao2189818

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by linyingjia at 2017-04-16 10:24:17
抗体不好使吧

才买回来的 我感觉是不是TBST洗三次把抗体洗掉了
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2017-04-17 10:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2017-04-15 22:50:56
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四季豆豆

银虫 (正式写手)
我们转膜是35v，60min。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2017-04-15 23:14:02
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cxw123

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换个抗体吧，不过博士德的抗体质量本人不敢苟同，听过很多内幕

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-04-15 23:17:16
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