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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » WB一直做不出来求教大神啊！！！！！！！
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xiao2189818

金虫 (正式写手)

[交流] WB一直做不出来求教大神啊！！！！！！！ 已有12人参与

求教各位大神
本人做WB好久   
一抗1：500 （2μl） TBST稀释 博士德β-actin  
二抗1：2000 （1μl）TBST稀释 三箭羊抗鼠

上胶80v 下胶120v   转膜40min 200mA
封闭1.5h
一抗过夜 洗三次
二抗2小时 洗三次

每次条件都一样而且我目的条带CYP450s都出来了，反而内参没有出来。很郁闷
大神看看我的条带
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1楼 2017-04-15 17:08:02
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xiao2189818

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 鲨鱼999 at 2017-04-17 15:19:15
我是刚进实验室，跟内参一直有仇，但是CST的βactin，一抗1:2000，二抗1:4000，恒压100v转45~分钟1小时都可以出来，之前用锐抗的就不行，你可以换个公司的试试

二抗1：4000会不会影响啥啊
赞一下 回复此楼
13楼2017-04-18 11:47:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2017-04-15 22:50:56
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

四季豆豆

银虫 (正式写手)
我们转膜是35v，60min。

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3楼2017-04-15 23:14:02
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cxw123

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换个抗体吧，不过博士德的抗体质量本人不敢苟同，听过很多内幕

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-04-15 23:17:16
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