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镍柱纯化洗脱
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样品在-20℃冻存了三天，之后用含20mM咪唑的平衡液重悬 超声破碎，工作3秒，间歇7秒。每轮99次，三轮 离心取上清 过柱： 上样前，20mM咪唑平衡， 上样， 上样后，20mM咪唑平衡液淋洗至基线 各梯度浓度的洗脱液洗脱 问题就出现在这，什么也没洗脱下来，500mM咪唑洗脱也是什么都没有，始终在基线位置，这是发生了什么？ 另外，我用的是GE 1ml预装柱，是不是柱子选的太小了？ |
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你可以取样跑蛋白胶，取超声后的上清及沉淀和过柱子后流出液，如果都没有说明蛋白没有表达，只有沉淀里有说明蛋白形成包涵体了，上清和流出液里都有说明蛋白没被挂住。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-04-10 22:01:01