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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » DE3细胞表达不出来我要的蛋白了，求助啊
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璐璐虫

新虫 (初入文坛)

[求助] DE3细胞表达不出来我要的蛋白了，求助啊 已有1人参与

本人目前在做毕设，是从大肠杆菌DE3细胞表达一种蛋白，用IPTG诱导，刚开始做少量表达时还有，可是到后来大量时表达量就很少，做了很多次都做不出来，要送去测序了，不知道大家有什么看法啊

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-04-05 16:11:39
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zkapan

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2017-04-06 23:49:20
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一开始没有经过诱导？诱导之后可能由于表达量太高形成包涵体了，你可以验证一下
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···
2楼2017-04-06 12:26:29
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璐璐虫

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2017-04-06 12:26:29
一开始没有经过诱导？诱导之后可能由于表达量太高形成包涵体了，你可以验证一下

不知道啊，破碎后的细胞沉淀跑胶都没有要的蛋白

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4楼2017-04-07 22:40:02
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
4楼: Originally posted by 璐璐虫 at 2017-04-07 22:40:02
不知道啊，破碎后的细胞沉淀跑胶都没有要的蛋白
...

如果是这样的话可能就是没表达，你看一下质粒构建的对不对

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···
5楼2017-04-07 22:45:04
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