应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物纯化
71/1返回列表
查看: 2733  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

M-小妮儿

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物纯化 已有2人参与

用Takara的PCR纯化试剂盒纯化以cDNA为模板的pcr产物，结果纯化后260/280在1.4-1.5之间，260/230＜1，没有峰，浓度只有十几ng/ul。纯化之前的260/280在1.8左右，浓度在400ng/ul左右。也试过胶回收的试剂盒，效果也不好。

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2017-04-04 17:26:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18716248350

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-04-06 20:44:00
做PCR时多扩几管，25ul体系我一般都扩8管，然后胶回收，吸附时放5分钟，然后回收一遍。加了漂洗液开盖放5分钟有利于酒精挥发。空管离心后我都会放65°烤箱8分钟。洗脱加了水后也放5分钟，有利于洗脱。
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

M-小妮儿
2楼2017-04-05 15:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以考虑磁珠纯化
赞一下 回复此楼
3楼2017-04-06 09:59:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

M-小妮儿

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
内容已删除
回复此楼
4楼2017-04-06 19:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18716248350

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by M-小妮儿 at 2017-04-06 19:54:23
谢谢，65℃水浴5分钟可以吗？反正就是每个步骤都要多等待几分钟是吧。我的mRNA260/280在1.9左右，但是260/230只有0.5左右，会不会对后续的操作有影响？
...

最好烤箱，水浴会有水蒸气。浓度还可以的话，可以试试。我没做过RNA。做过DNA。有时候260/230不是很好还是继续往下做了的
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2017-04-06 20:07:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

M-小妮儿

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 18716248350 at 2017-04-06 20:07:00
最好烤箱，水浴会有水蒸气。浓度还可以的话，可以试试。我没做过RNA。做过DNA。有时候260/230不是很好还是继续往下做了的...

好的，我多65℃试试，之前几次也都多等待5分钟了，但是效果还是不好，230 260 280值都特别低。PCR的8管您是纯化的时候混合在一起 然后进行后续的纯化操作吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-06 20:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

M-小妮儿

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 狗狗狗尾巴草 at 2017-04-06 09:59:17
可以考虑磁珠纯化

谢谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
7楼2017-04-06 20:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 M-小妮儿 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-15 07:38 by C79jjtjAKjEn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:49 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 05:34 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-15 05:26 by 5BDX0d0WFp7t
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 05:22 by 5BDX0d0WFp7t
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:13 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-15 05:01 by mibUvS8DDCwf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 01:21 by mibUvS8DDCwf
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 00:21 by mibUvS8DDCwf
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 21:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭