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fighting~~

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒构建 已有2人参与

最近一直在做购质粒,但是涂板挑了单克隆以后测序发现全部都是空载 不知道为啥一直没有连接上

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飞沙狼烟

新虫 (正式写手)

你的思路是什么?中间载体是什么?PCR类型?

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爱拼才会赢!
2楼2017-03-29 23:24:07
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csunny521

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

3楼2017-03-29 23:25:49
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fighting~~

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞沙狼烟 at 2017-03-29 23:24:07
你的思路是什么?中间载体是什么?PCR类型?

我有一个真核质粒 现在在构原核 载体用的pet-28a 我在真核里面p出我的目的片段 然后做的酶切连接转化

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4楼2017-03-30 10:07:19
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fighting~~

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by csunny521 at 2017-03-29 23:25:49
可以先做个菌落PCR鉴定下看看

我连接以后跑胶看了的 连接上了但是不是很深 但不知为什么菌落挑的几个都是空载

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5楼2017-03-30 10:08:32
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孔飞东落

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-30 22:41:37
对于不是很亮的带  我觉得还是重新做比较好,这样的话才能排除这个因素,后面判断才能更清楚。
6楼2017-03-30 18:54:12
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小苦孩纸

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-30 22:41:49
你连接的时候要做个空载体的对照,如果对照组也长菌了,那就说明连接的是载体
7楼2017-03-30 20:54:30
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你可以把你的构建思路发上来看看,来看看你的设计是否有问题的,这样会好一点
不是不能,只是不想
8楼2017-04-02 09:47:36
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江边鸟

银虫 (小有名气)

9楼2017-04-02 11:01:07
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