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nieli

银虫 (小有名气)

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[求助] 高效液相色谱重复性问题已有4人参与

各位虫友，我最近在用高效液相色谱测盐酸土霉素准品时，同一浓度连进6针，峰面积相差很大，相对标准偏差达到16％，保留时间几乎不变，有没有遇到这类问题的虫友，请教下是什么原因啊？万分感谢~改流动相组成、波长、换柱子还是有这种问题(ps：有定量环，可以排除进样量不一样的情况；用同一台液相测别的物质，重现性较好，相对标准偏差在1％，说明仪器和人为操作应该也没问题)

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1楼 2017-03-23 21:35:39

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nieli

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引用回帖:

10楼: Originally posted by 忍冬1018 at 2017-03-25 08:59:29
建议如下：
1、如是手动进样，进样体积最好是定量环的2倍以上，如20μl定量环，进样量在50μl以上；
2、查看积分是否正常，如果拖尾很严重而峰面积又比较小的话，积分影响会尤其大；
3、可以更换适用的色谱柱或是 ...

1：定量环是20ul，我每次进样大约40ul，不到50ul，会不会有影响？
2：峰面积60多万，手动积分和自动积分都试了，都差别很大；下面附两张同一浓度连进七针的谱图，一张是重叠在一起的，一张是我右移后的
3：柱子也换过了，不知道是不是换的柱子不合适，还是有同样的现象