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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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stantontang

实习版主

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[求助] 关于苯酚硫酸法测多糖问题 已有8人参与

测量方法

1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖),配制成0。1g/L,分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置30分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线


每次测标曲同样的条件,得出的结果都不一样,样品平行样之间差别都较大

问题:加硫酸时到底是快速加入,让其放热还是慢慢加?快速加入时,立马变成橙黄色,慢慢加入时,都不变色。

我都测了几次了,没一次稳定的,求大神支招

哪位经常测的,分享下技巧
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MorsThanatos

兑换贵宾

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我都是贴壁加的硫酸,先加样品,再加苯酚,最后浓硫酸。然后充分震荡(很重要),然后等待时间,测定吸光值。
注意的点:1.浓硫酸最后使用同一瓶,因为浓硫酸每一瓶还是有差异的(厂家,批次) 2.苯酚我都是一次配置大量,够用半个月的,不然每次配置还是有差异的 3.这个实验还是很灵敏的,操作手法(最好同一个人操作) 4.标曲最好换了不同批次硫酸和新配苯酚都重新测量,不能一直使用最早做的标曲,不然变化很大。
能想到的就是这么多,我做重复性还是很高的。
9楼2017-03-24 10:22:11
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倾雨晨

管理员

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2楼2017-03-23 11:25:36
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zsj19910511

实习版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!

3楼2017-03-23 12:01:35
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duliyu

管理员

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移液管一曲就重力下加入,密封后摇匀,按照方法,就行了,

发自小木虫Android客户端
守候之戒
4楼2017-03-23 21:12:51
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