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stantontang

金虫 (小有名气)

[求助] 关于苯酚硫酸法测多糖问题 已有8人参与

测量方法

1.制作标准曲线:准确称取标准葡聚糖(或葡萄糖),配制成0。1g/L,分别吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却,室温放置30分钟以后于490nm测光密度,以2.0ml水按同样显色操作为空白,横坐标为多糖微克数,纵坐标为光密度值,得标准曲线


每次测标曲同样的条件,得出的结果都不一样,样品平行样之间差别都较大

问题:加硫酸时到底是快速加入,让其放热还是慢慢加?快速加入时,立马变成橙黄色,慢慢加入时,都不变色。

我都测了几次了,没一次稳定的,求大神支招

哪位经常测的,分享下技巧
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qingxiayuan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我很是奇怪浓硫酸加入时如何快速或如何缓慢,难道不都是松开移液管上方让其自然落下。如果一下子加很多管是没有办法控制都以同一种方式加入,垂直加入时,混合物马上就会反应显色,如果贴壁会相对慢些,后续摇匀都没有什么明显误差。个人认为这个方法很稳定,做标曲很关键的是标准品的配制、稀释及加入。
8楼2017-03-24 09:09:19
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倾雨晨

木虫 (著名写手)

2楼2017-03-23 11:25:36
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zsj19910511

金虫 (小有名气)

3楼2017-03-23 12:01:35
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duliyu

木虫 (著名写手)

移液管一曲就重力下加入,密封后摇匀,按照方法,就行了,

发自小木虫Android客户端
守候之戒
4楼2017-03-23 21:12:51
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