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小鱼儿317

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子连接GUS转化植物检测有问题 已有1人参与

用了自己的特异启动子连接GUS报告基因,转化植物,DNA检测为阳性,有用报告基因的一对引物,也有用载体加启动子的一对引物,都能检测到特异性条带,但总是染不出来,可能是哪个环节的问题?
有没有做启动子GUS报告基因的交流一下呗,谢谢~
在烟草里能检测到GUS活性,可转到菊花就没有了

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安神搞科研

新虫 (初入文坛)

你还在做gus载体吗,请问你的启动子是如何克隆的?

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2楼2017-11-10 15:48:06
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啊啊鱼先森

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 安神搞科研 at 2017-11-10 15:48:06
你还在做gus载体吗,请问你的启动子是如何克隆的?

直接公司合成
3楼2017-12-28 11:39:52
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lutu2018

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你染了几个株系???如果是一个的话可能是表达水平低或没表达
4楼2018-01-22 15:10:11
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352888358

新虫 (初入文坛)

我也是同样的情况呐,我是在水稻上做的,用的载体是pCAMBIA1381,连接的基因启动子,但是所用PCR阳性株系都染不出来,好奇怪,楼主你的问题解决了吗?
2312
5楼2018-04-09 20:33:56
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pjxiongjing

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 352888358 at 2018-04-09 20:33:56
我也是同样的情况呐,我是在水稻上做的,用的载体是pCAMBIA1381,连接的基因启动子,但是所用PCR阳性株系都染不出来,好奇怪,楼主你的问题解决了吗?

你们启动子一般选多长,包不包括5,UTR区,用什么方法连的,我用的同源重组连1391都快一个月了也没连上去

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6楼2018-04-10 00:23:02
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