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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 启动子连接GUS转化植物检测有问题
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小鱼儿317

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子连接GUS转化植物检测有问题 已有1人参与

用了自己的特异启动子连接GUS报告基因，转化植物，DNA检测为阳性，有用报告基因的一对引物，也有用载体加启动子的一对引物，都能检测到特异性条带，但总是染不出来，可能是哪个环节的问题？
有没有做启动子GUS报告基因的交流一下呗，谢谢～
在烟草里能检测到GUS活性，可转到菊花就没有了

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1楼 2017-03-12 23:31:21
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安神搞科研

新虫 (初入文坛)
你还在做gus载体吗，请问你的启动子是如何克隆的？

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2楼2017-11-10 15:48:06
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啊啊鱼先森

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 安神搞科研 at 2017-11-10 15:48:06
你还在做gus载体吗，请问你的启动子是如何克隆的？

直接公司合成
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3楼2017-12-28 11:39:52
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lutu2018

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你染了几个株系？？？如果是一个的话可能是表达水平低或没表达
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4楼2018-01-22 15:10:11
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352888358

新虫 (初入文坛)
我也是同样的情况呐，我是在水稻上做的，用的载体是pCAMBIA1381，连接的基因启动子，但是所用PCR阳性株系都染不出来，好奇怪，楼主你的问题解决了吗？
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2312
5楼2018-04-09 20:33:56
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pjxiongjing

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 352888358 at 2018-04-09 20:33:56
我也是同样的情况呐，我是在水稻上做的，用的载体是pCAMBIA1381，连接的基因启动子，但是所用PCR阳性株系都染不出来，好奇怪，楼主你的问题解决了吗？

你们启动子一般选多长，包不包括5,UTR区，用什么方法连的，我用的同源重组连1391都快一个月了也没连上去

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6楼2018-04-10 00:23:02
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