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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

[交流] 请各位高手帮忙看看,我这设计的引物可以不?

pcr的产物为:517,这个好像有点儿大,可以不?还有想问一下,做pcr是摸索的tm值是引物的,还是这个产物的,小白一个求帮忙。

请各位高手帮忙看看,我这设计的引物可以不?
引物.png
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cifer1230

金虫 (著名写手)

cifer1230

我BLAST之后,特异性极差,不知道咋办?这个基因的模板比较难设计引物,我是慢慢找的这对引物,好不容易能满足下边这下条件,可是特异性又极低,我都愁死了。
.....
2楼2017-03-09 15:30:36
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快乐农夫

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-10 07:40:38
你做定量还是扩基因?定量的话目的片段以150bp最好,扩基因的话不用考虑那么多,上下游引物退火温度差异不大就行,我都用肉眼设计的,从来不用软件

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-03-10 07:23:51
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huyan0817

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是扩增什么来源的基因?如果是已经有的质粒上基因,那没问题!如果扩增原核基因组上面的基因,那你可以把引物加长

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4楼2017-03-10 08:06:13
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