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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 研究蛋白结构（即蛋白结晶或超低温电镜）前如何获得纯化蛋白？
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汤汤2016

新虫 (初入文坛)

[求助] 研究蛋白结构（即蛋白结晶或超低温电镜）前如何获得纯化蛋白？

要想研究蛋白结构，蛋白结晶方法与超低温电镜方法对于蛋白的要求有什么区别吗？原核诱导后获得的蛋白过NI柱纯化会有很多杂带，怎么办？一般研究结构的，蛋白如何纯化？

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2017-03-08 20:20:23
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汤汤2016

新虫 (初入文坛)
是新手，求大家帮帮忙

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2楼2017-03-08 20:22:43
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6827089

金虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-09 07:41:13
可以用别的柱子再纯化，比如离子交换，分子筛。但是一般过完NI柱不会有太多杂带

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3楼2017-03-08 23:40:09
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
蛋白纯化系统，貌似叫akata，GE的

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4楼2017-03-09 00:28:37
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汤汤2016

新虫 (初入文坛)
做结晶不是要求蛋白的量吗？我的蛋白本身就是主要在包涵体里，上清量不高经过多次纯化后会不会没有了呢？

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5楼2017-03-11 21:51:56
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jtjhszl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 6827089 at 2017-03-08 23:40:09
可以用别的柱子再纯化，比如离子交换，分子筛。但是一般过完NI柱不会有太多杂带

AKTA挂完NI柱的可以用 冻干来浓缩吗？  纯化时间长（纯了4个酶大概近两个月了，纯好的未浓缩的约0.1mg/ml的酶一直放在4度冰箱，）对结晶有没有影响？ 纯化好的蛋白是否需要-20保存？
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6楼2017-04-06 16:47:27
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