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risic

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 10
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在线: 47.6小时
虫号: 4431682
注册: 2016-02-24
专业: 生态系统生态学

[求助] 请教质粒小提浓度低已有3人参与

新手求助，质粒提取多次都只有20ng/ul左右，电泳几乎无条带。
几次小提过程和结果如下：
摇菌时间    菌液量          洗脱       洗脱次数质粒浓度
48h左右    2ml          80ul          2       10ng/ul
17h          3ml*2管合并 40ul 3       30ng/ul
16h          5ml*2管合并 50ul    3       20ng/ul
还要做测序和酶切，求教如何提升质粒浓度？

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克隆活化小提质粒相关问题已经有4人回复

1楼 2017-03-07 19:34:12

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pansya

新虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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红花: 2
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虫号: 5844375
注册: 2017-03-05
专业: 环境微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

引用回帖:

1楼: Originally posted by risic at 2017-03-07 19:34:12
新手求助，质粒提取多次都只有20ng/ul左右，电泳几乎无条带。
几次小提过程和结果如下：
摇菌时间    菌液量          洗脱       洗脱次数质粒浓度
48h左右    2ml          80ul          2       10ng/ul
17h    ...

请问你是用什么洗脱的？洗脱的时候可以将洗脱液换成3mol/l的NaoH。还有提质粒之前可以将组合管活化一下。希望对你有帮助

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