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ruoxinhappy新虫 (小有名气)
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[求助]
求助各位大神帮我看下琼脂糖凝胶电泳图，谢谢！ 已有1人参与
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大家好，下面是我质粒提取后的琼脂糖凝胶电泳图，前面的6个条带是我们用自己的试剂提取的质粒，后面两个是试剂盒提取的质粒，我想问下前面的质粒是什么原因导致的？某个试剂出错了？谢谢 质粒提取.PNG |
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【答案】应助回帖
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ruoxinhappy: 金币+15, 我将几个样品单酶切了下，前面的几个在目的大小处有很浅的条带，试剂盒的正常。后面我又测试了下看是否溶液的问题，结果排除了这个原因，不知道到底是什么情况 2017-03-08 09:47:42
感谢参与，应助指数 +1
ruoxinhappy: 金币+15, 我将几个样品单酶切了下，前面的几个在目的大小处有很浅的条带，试剂盒的正常。后面我又测试了下看是否溶液的问题，结果排除了这个原因，不知道到底是什么情况 2017-03-08 09:47:42
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质粒在琼脂糖凝胶电泳中存在三条电泳条带，按照Marker的位置从大到小依次为：线性DNA，松散的环状DNA，超螺旋结构DNA（在松散环状DNA的基础上进一步盘曲折叠形成的紧致的环状DNA） 其实这三种结构分子量相同，由于空间结构的差异导致在琼脂糖凝胶电泳中迁移率不同，因此出现三条条带。 标准的质粒提取实验中只存在后两种结构，线性DNA是由于提取操作过于剧烈或缓冲溶液pH不适宜造成的DNA断裂。 楼主可以做个单酶切，一目了然。 |
2楼2017-03-07 09:17:52
3楼2017-03-07 11:30:40
ruoxinhappy
新虫 (小有名气)
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4楼2017-03-07 13:00:08
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