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不白不白

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于植物愈伤组织培养到悬浮细胞的过程中的一些问题 已有1人参与

本人是药学专业,但是毕业课题做的是一种蕨类植物,又愈伤组织培养到悬浮细胞,加入各种激素,气体什么,然后培养一段时间,看代谢产物的量,找出最优。问题1我想知道愈伤组织培养到悬浮细胞的具体流程?应该是先把愈伤组织培养转化成单细胞,然后放到液体培养基中通过摇床不断的震荡,使其保持悬浮细胞这一状态吧?问题2,如何把愈伤组织变成单细胞?我查文献,直接放到液体培养基,放摇床,10天后就直接是愈伤组织了,但是植物组织培养这本书上说还需要过滤离心什么的,到底应该采取哪种?问题3,这个悬浮细胞培养应该做多少量?一个学长说是要做30组,要不没有统计学意义?但是,又一小块愈伤组织不是还可以培养很多悬浮细胞,只要把培养时间延长,悬浮细胞的量不就足够多了么?
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kindywind

铁杆木虫 (职业作家)

用疏松的亮黄色或者白色的愈伤组织上摇床,培养基定量,投入愈伤组织定量,摇完10天,可以把小细胞团带培养基倒出来,完全单细胞非常难,而且生长缓慢,需要过细胞筛

发自小木虫IOS客户端
拖延症患者懒癌晚期~
2楼2017-03-03 09:42:26
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6_pengfei

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我做水稻和烟草悬浮。你把分散性好的愈伤组织放到液体培养基中在摇床上120-140rpm转速摇,培养10天左右,有小的愈伤组织会分散下来,用移液管吸取或滤网过滤得到,继代到新的培养基中,如此培养继代,每次取细小愈伤组织,知道最后获得由几个细胞组成的细胞团,没有完全的单细胞植物悬浮培养体系,这是细胞本身决定的。
努力精修
3楼2017-03-06 16:39:01
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