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浮生若茶520

铜虫 (小有名气)

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[求助] 小肽电泳相关问题已有3人参与

最近想跑Tricine-SDS-PAGE电泳，可是配的胶始终不凝固，是什么问题呢？会不会是因为我在配凝胶缓冲液和凝胶储存液的时候加过热啊？

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1楼 2017-03-02 11:09:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

黎可遇likeyu

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

9楼: Originally posted by 浮生若茶520 at 2017-03-06 16:19:52
哦哦，还有一个问题就是染色液脱色液和样品缓冲液可以用一般的SDS-PAGE电泳用的那种吗...

我看的文献说用的不是一般的那种
“取出平板中的凝胶立即浸泡于固定液(50 %乙醇, 10 %冰乙酸)中固定1 h , 再将固定后的凝胶置于45 ℃的染色液(1 g·L-1考马斯亮蓝R-250 的25 %乙醇, 8 %冰乙酸)中浸泡15 ～ 30 min , 然后用蒸馏水将凝胶淋洗一次, 最后, 多次变换脱色液(25 %乙醇,8 %冰乙酸, 以上均为体积分数), 直至凝胶上背景脱净为止。”