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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 双向电泳图谱求助
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nicole9208

新虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳图谱求助 已有2人参与

各位朋友大家好，如图这是我跑的双向电泳图，请大家帮我分析一下出现这种图像的原因是什么？胶条是GE公司的，18cm ph4-7 线性。上样量是600ug。考马斯亮兰G250染色。聚焦程序如下：
1.Stp  250v  3h  375Vhr
2.Stp  500v  1h  500Vhr
3.Grd  1000v  1h4min  800Vhr
4.Grd  8000v  3h  13500Vhr
5.Stp  8000v  2h   16000Vhr
total  10h4min 31175Vhr
6.（hold）stp  500v 20h 10000Vhr
请大家帮我看看这是什么原因呢？因为接下来要打质谱，所以不能用银染。
谢谢各位了！

双向电泳图谱求助


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1楼 2017-02-27 15:57:15
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RUSH夏至未至

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

纵向形成下雨状严重拖尾，Tris-HCL的PH不对，比如该8.8的PH用8.3的PH就会出现该症状；
降低上样量试一试
杂质影响也可能，多用丙酮沉淀试试
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4楼2017-05-05 18:51:26
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我感觉是pH等电点分离不好第二相电泳和染色都不容易引起问题。
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2楼2017-02-28 09:07:36
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fenngso

新虫 (初入文坛)
可以试着改变上样量

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3楼2017-05-05 09:04:15
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