| 查看: 1702 | 回复: 14 | ||
[求助]
新手求助克隆 已有4人参与
|
||
|
各位大神,我的目的基因是2000左右,我连T载体做转化,菌长得也挺好,可是菌液PCR啥都没有,这是没连上吗??求大神指点 还想求助下大神们平时用的克隆载体有哪些 发自小木虫Android客户端 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
阿莫奈韦(Amenamevir):解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有275人回复
利瑞鲁单抗:靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体,结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
Wnt-C59:PORCN靶向化学探针,Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
Fexaramine:肠道限制性FXR化学探针,结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
NVS-STG2:靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂,结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
DOTA-GPC3肽(CAS 3066439-94-6):双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选?现货与质控要点
已经有0人回复
SEL120-34A HCl:CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复

小冀-
版主 (著名写手)
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物

2楼2017-02-25 09:18:44
as1688816
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3102.7
- 散金: 3000
- 红花: 5
- 帖子: 821
- 在线: 205.7小时
- 虫号: 1213860
- 注册: 2011-02-26
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
|
对照要好,ta克隆确实不好做,我想应该和自身片段的加a效率也有关系,这个可能和用的扩增酶有关,我之前做的阳性对照百分百连上,但是目的片段就是连不上或者连接效率低 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-02-25 15:42:23

7楼2017-02-25 16:55:29

3楼2017-02-25 10:27:28
as1688816
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3102.7
- 散金: 3000
- 红花: 5
- 帖子: 821
- 在线: 205.7小时
- 虫号: 1213860
- 注册: 2011-02-26
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2017-02-25 15:43:45

6楼2017-02-25 16:53:35
小冀-
版主 (著名写手)
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物

8楼2017-02-25 16:56:13
timberstar
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 397
- 帖子: 48
- 在线: 22.9小时
- 虫号: 5351534
- 注册: 2016-12-13
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
菌长得很好,但是没有P出来,如果PCR条件一切正确,那就说明是假阳性,这种情况,很大程度上是酶切没有切好,头没有切开,连接不上,或者极少部分连接,导致假阳性太多!好好切吧,加大酶切浓度,延长酶切时间。祝你好运![]() ![]() 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-02-26 07:43:23
游侠892
铁杆木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 49 (小学生)
- 金币: 8246.4
- 散金: 76
- 红花: 6
- 帖子: 2102
- 在线: 138.9小时
- 虫号: 490693
- 注册: 2008-01-03
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学

10楼2017-02-26 09:54:34










回复此楼
