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各位大神，我的目的基因是2000左右，我连T载体做转化，菌长得也挺好，可是菌液PCR啥都没有，这是没连上吗？？求大神指点 还想求助下大神们平时用的克隆载体有哪些 发自小木虫Android客户端 |
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2楼2017-02-25 09:18:44
as1688816
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对照要好，ta克隆确实不好做，我想应该和自身片段的加a效率也有关系，这个可能和用的扩增酶有关，我之前做的阳性对照百分百连上，但是目的片段就是连不上或者连接效率低 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-02-25 15:42:23
7楼2017-02-25 16:55:29
3楼2017-02-25 10:27:28
as1688816
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5楼2017-02-25 15:43:45
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8楼2017-02-25 16:56:13
timberstar
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菌长得很好，但是没有P出来，如果PCR条件一切正确，那就说明是假阳性，这种情况，很大程度上是酶切没有切好，头没有切开，连接不上，或者极少部分连接，导致假阳性太多！好好切吧，加大酶切浓度，延长酶切时间。祝你好运 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-02-26 07:43:23
游侠892
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10楼2017-02-26 09:54:34