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各位大神,我的目的基因是2000左右,我连T载体做转化,菌长得也挺好,可是菌液PCR啥都没有,这是没连上吗??求大神指点 还想求助下大神们平时用的克隆载体有哪些 发自小木虫Android客户端 |
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小冀-
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2楼2017-02-25 09:18:44
as1688816
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对照要好,ta克隆确实不好做,我想应该和自身片段的加a效率也有关系,这个可能和用的扩增酶有关,我之前做的阳性对照百分百连上,但是目的片段就是连不上或者连接效率低 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-02-25 15:42:23

7楼2017-02-25 16:55:29

3楼2017-02-25 10:27:28
as1688816
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5楼2017-02-25 15:43:45

6楼2017-02-25 16:53:35
小冀-
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8楼2017-02-25 16:56:13
timberstar
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菌长得很好,但是没有P出来,如果PCR条件一切正确,那就说明是假阳性,这种情况,很大程度上是酶切没有切好,头没有切开,连接不上,或者极少部分连接,导致假阳性太多!好好切吧,加大酶切浓度,延长酶切时间。祝你好运![]() ![]() 发自小木虫Android客户端 |
9楼2017-02-26 07:43:23
游侠892
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10楼2017-02-26 09:54:34












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