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圆加leaf新虫 (小有名气)
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[交流]
SDS-PAGE电泳图：这是不是没有表达目标蛋白？
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本人用pET24a转了段基因进BL21，想表达一个蛋白，是43.5kDa的。加诱导剂后取上清跑电泳，结果如图，想请问各位前辈，这是不是代表没有表达出目标蛋白？摸索四个浓度，不加诱导剂为对照，分别诱导6h 和8h。第一次做这种实验，这是第一次跑，跑的其实很丑，把握不太好，还请大家多多 提提意见，我好以后优化  IMG_20170223_105600_副本_副本.jpg  IMG_20170223_105600_副本1.jpg |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+3, 好的，那一般沉淀要怎么处理？浓度一般用几个来试比较好？诱导时间又从什么时候开始收来跑电泳比较好，现在感觉好像0h，2h，这些时间没必要收来跑电泳 2017-02-28 09:27:56
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+3, 好的，那一般沉淀要怎么处理？浓度一般用几个来试比较好？诱导时间又从什么时候开始收来跑电泳比较好，现在感觉好像0h，2h，这些时间没必要收来跑电泳 2017-02-28 09:27:56
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无诱导剂浓度上样有点高，上清液和沉淀都要上样，目前看是没有表达或者表达量非常少。 发自小木虫IOS客户端 |
8楼2017-02-24 20:50:10
4楼2017-02-24 14:01:10
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+1, 因为想着反正包涵体表达也是不好的，最主要是上清有，就只做了上清 2017-02-24 15:09:25
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
圆加leaf: 金币+1, 因为想着反正包涵体表达也是不好的，最主要是上清有，就只做了上清 2017-02-24 15:09:25
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应该是没有表达。为什么没有点包涵体的样品？有可能是包涵体表达呢？很久没做表达了。小木虫上一定有很多牛人。祝福。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-02-24 14:03:38
6楼2017-02-24 14:08:25