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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 酶分子量大小确定
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yoyoisagirl

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶分子量大小确定 已有1人参与

构建fosmid文库筛到了20株阳性克隆子，液体培养也有酶活，现在想知道酶分子量大小，该如何确定呢？

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1楼 2017-02-23 17:00:53
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
纯化出来跑个SDS PAGE
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2楼2017-02-23 17:23:57
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北国佳人

铜虫 (小有名气)
楼上说的跑SDS-PAGE，是可行的，、、
或者HPLC，分别收集酶峰，检测活性高低，，这个麻烦些
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努力的小蜜蜂
3楼2017-02-24 10:09:31
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yoyoisagirl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2017-02-23 17:23:57
纯化出来跑个SDS PAGE

主要是老师只是单纯的想看看这20个克隆子产酶分子量大小，纯化比较耗时，而且这20个重组菌产的酶可能性质差别比较大，一时半会儿不能完成，所以想避过纯化这个步骤。。。您知道粗酶液怎么看分子量吗？SDS-PAGE能看出来吗？以没有酶活的重组菌作为对照是不是可以呢？

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4楼2017-02-24 23:42:02
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