应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验
汕头大学海洋科学接受调剂
91/1返回列表
查看: 1999  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大头妞妞

新虫 (小有名气)

[交流] 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验 已有4人参与

求师兄师姐指教，
我的问题是这样的：做的是SYBR-Green1荧光定量PCR试验，原理我都看了，但是看到最后并不知我的未知样品具体怎么测，我自己的理解是，待我将我所有的QPCR反应体系和程序都优化后（标准曲线OK，标准品重复试验OK，引物特异性QPCR检测OK），那么我就将我的未知样品稀释后与我的标准品一起放在定量PCR仪上反应是吗(PS,未知样品稀释的范围在标准品之内)，是这样吗，？？？？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-02-16 21:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seascen2016

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-02-16 22:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by seascen2016 at 2017-02-16 22:01:17
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

那未知样品要怎么破？怎么处理才能放在和最后处理的标准品一起反应？这是我在资料上面看到的，不应该是这样吗？求指教
求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-02-17 09:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贾子阳009

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-02-17 18:05:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

谢谢指教，清楚了
回复此楼
5楼2017-02-17 21:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2017-02-19 09:50:33
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

林志遥-14

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
理解的基本正确，可以做一次试试了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-02-19 10:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wsy0914 at 2017-02-19 09:50:33
标准曲线怎么做？我那个扩增率只有80%，怎么改进？求指导...

可以问一下你的PCR反应体系都是怎么摸索的吗，我的一对95bp的引物怎么都没弄出来，求指教，要不建议，可以加你QQ私聊吗
赞一下 回复此楼
8楼2017-02-19 12:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

可以再请教一下，做QPCR前PCR摸索反应体系都是怎么摸索的呢，如果遇到短片段引物（95bp,上下游引物Tm相差8摄氏度）怎么处理呢，谢谢了
赞一下 回复此楼
9楼2017-02-19 12:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大头妞妞 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 转长聘了 +3 简单化xn 2026-04-13 3/150 2026-04-13 14:18 by wwwkkk83
[考研] 297工科，求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +3 王ymaa 2026-04-13 3/150 2026-04-13 11:01 by zhshch
[考研] 考研二轮调剂 +10 故人?? 2026-04-09 10/500 2026-04-13 09:55 by szhize
[材料工程] 材料调剂推荐 +9 蛋糕x2 2026-04-07 9/450 2026-04-13 09:07 by lhj2009
[考研] 277求调剂 +23 倪建设 2026-04-06 23/1150 2026-04-13 00:40 by 王童子龙
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-11 8/400 2026-04-12 09:32 by 逆水乘风
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 一志愿京区985，085401电子信息，本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 275 求调剂 +8 Lei812514 2026-04-07 8/400 2026-04-08 12:46 by chemisry
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭