应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验
91/1返回列表
查看: 1968  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大头妞妞

新虫 (小有名气)

[交流] 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验 已有4人参与

求师兄师姐指教，
我的问题是这样的：做的是SYBR-Green1荧光定量PCR试验，原理我都看了，但是看到最后并不知我的未知样品具体怎么测，我自己的理解是，待我将我所有的QPCR反应体系和程序都优化后（标准曲线OK，标准品重复试验OK，引物特异性QPCR检测OK），那么我就将我的未知样品稀释后与我的标准品一起放在定量PCR仪上反应是吗(PS,未知样品稀释的范围在标准品之内)，是这样吗，？？？？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2017-02-16 21:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seascen2016

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-02-16 22:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by seascen2016 at 2017-02-16 22:01:17
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

那未知样品要怎么破？怎么处理才能放在和最后处理的标准品一起反应？这是我在资料上面看到的，不应该是这样吗？求指教
求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-02-17 09:49:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贾子阳009

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-02-17 18:05:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

谢谢指教，清楚了
回复此楼
5楼2017-02-17 21:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2017-02-19 09:50:33
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

林志遥-14

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
理解的基本正确，可以做一次试试了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-02-19 10:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wsy0914 at 2017-02-19 09:50:33
标准曲线怎么做？我那个扩增率只有80%，怎么改进？求指导...

可以问一下你的PCR反应体系都是怎么摸索的吗，我的一对95bp的引物怎么都没弄出来，求指教，要不建议，可以加你QQ私聊吗
赞一下 回复此楼
8楼2017-02-19 12:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

可以再请教一下，做QPCR前PCR摸索反应体系都是怎么摸索的呢，如果遇到短片段引物（95bp,上下游引物Tm相差8摄氏度）怎么处理呢，谢谢了
赞一下 回复此楼
9楼2017-02-19 12:19:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大头妞妞 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求材料，环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 11/550 2026-03-23 23:29 by 呆呆师姐
[考研] 070300化学求调剂 +8 苑豆豆 2026-03-20 8/400 2026-03-23 20:57 by baobaoye
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +3 WW.' 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:18 by 枫翼ljj
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +8 材料学257求调剂 2026-03-23 9/450 2026-03-23 13:01 by ztnimte
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭