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天生我材

新虫 (初入文坛)

[求助] 泛素化修饰 已有3人参与

最近在做泛素化类相关课题
过表达A蛋白下调了B蛋白的表达,然后用MG132处理之后,发现B蛋白的表达量明显回升,我认为是A蛋白促进了B蛋白的泛素化,但是我进行IP,不知道为什么过表达A之后,B的泛素化反而降低,做了很久了,一直找不到原因,有没有做这方面的同仁,是什么原因,不甚感激啊
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drwhoknowss

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【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 天生我材 at 2017-02-17 12:15:17
我觉得你说的很有道理,那证明它在转录水平有变化,是不是只有做定量了...

这只是一个假设。你做一下qpcr,也许可能呢。再查查文献看看有没有别的机制。跟老师同学讨论下

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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
7楼2017-02-17 12:21:18
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-02-18 22:09:39
MG132是蛋白酶抑制剂,所以能间接表明B在A的作用下被下调了。但下调的机制有很多,不一定是ubiquitination。还可能有其他机制,比如a抑制了b的转录。可能你的数据没问题,不过要讲一个不同的story

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2楼2017-02-15 20:20:02
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天生我材

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by drwhoknowss at 2017-02-15 20:20:02
MG132是蛋白酶抑制剂,所以能间接表明B在A的作用下被下调了。但下调的机制有很多,不一定是ubiquitination。还可能有其他机制,比如a抑制了b的转录。可能你的数据没问题,不过要讲一个不同的story
...

谢谢您的回复。如果是A在转录水平上抑制了B的表达,那用MG132处理后B的表达量应该不会变吧
3楼2017-02-17 11:04:28
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 天生我材 at 2017-02-17 11:04:28
谢谢您的回复。如果是A在转录水平上抑制了B的表达,那用MG132处理后B的表达量应该不会变吧...

当然变了。不生产了,但mg132后也不降解。跟control比,就显得高.

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4楼2017-02-17 11:36:33
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