24小时热门版块排行榜

返回列表

karkilin

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2
帖子: 13
在线: 5.1小时
虫号: 865432
注册: 2009-10-08
性别: GG
专业: 生物化学

[交流] 蛋白质二聚体问题 sds page 和 native page 已有3人参与

求救各位大神

本人分离的蛋白质在凝胶电泳和native page显示分子量约210 kDa，但是12.5% sds page 显示两条明显条带约200 kDa和15 kDa，这条15kDa 条带在之前分离过程中一直存在。初步下结论是一个二聚体。

问题是， sds page 显示的两条条带粗细有很大区别，200 kDa的条带很粗，而15 kDa的比较细。编辑提出如果是二聚体，条带粗细应该一样，需要解释这个问题。

请有经验的前辈不吝赐教。

回复此楼

» 猜你喜欢

HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有252人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

有限的生命探索无穷的世界

1楼 2017-02-07 22:53:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Fannie_cool

木虫 (正式写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 1948.8
红花: 3
帖子: 322
在线: 55.5小时
虫号: 2985224
注册: 2014-02-22
专业: 生物大分子结构与功能

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-08 21:29:18

说的是复合物，不是二聚体吧？一般说，如果是1:1的复合物，那么复合物中较大的一个着色能力要更强一些，何况二者分子量差别显著，在胶图上肯定粗细差别明显。再有一个，单一浓度的胶，分离这两个蛋白不合适，可以考虑使用梯度胶，来平衡胶本身带来的差距。

发自小木虫Android客户端

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2017-02-08 08:38:55

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

karkilin

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2
帖子: 13
在线: 5.1小时
虫号: 865432
注册: 2009-10-08
性别: GG
专业: 生物化学

引用回帖:

2楼: Originally posted by Fannie_cool at 2017-02-08 07:38:55
说的是复合物，不是二聚体吧？一般说，如果是1:1的复合物，那么复合物中较大的一个着色能力要更强一些，何况二者分子量差别显著，在胶图上肯定粗细差别明显。再有一个，单一浓度的胶，分离这两个蛋白不合适，可以考 ...

谢谢您给的建议。我想您说的着色能力是其中原因之一。其实应该跑一个2D电泳或者等电点聚焦电泳来验证一下。另外我推测可能样品不纯，存在两个分子量非常接近的蛋白，其中一个是复合物，由于分子量较大，12.5%的胶分不开，就显示一条条带，应跑个8%的试试。