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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » LB平板培养大肠杆菌，不长菌，或零星几个
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upwardkl

新虫 (初入文坛)

[求助] LB平板培养大肠杆菌，不长菌，或零星几个 已有5人参与

近一个多月以来，自制的感受态细胞（Top10和DH5&）,测OD600值，均为0.5左右，

后将T-A克隆的产物做转化，使用的平板为LB固体平板，平板涂布，37度培养，至少要等14-16h后，才能看到零星的菌，且特小，有时候甚至没有菌，，

寻求原因和实验指导和帮助！
谢谢！
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雪霁花开，向上追求
1楼 2017-01-10 14:52:03
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wskisaac

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
11楼: Originally posted by upwardkl at 2017-01-11 16:42:47
谢谢你的应助，请问如何使用买来的感受态，以此为基础做自己的感受态呢？...

就用一般的氯化钙方法做就好，网上很多，一查就知道。关键是菌不要长过了，和氯化钙要纯。

发自小木虫IOS客户端
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upwardkl
12楼2017-01-12 07:51:52
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hch123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-01-11 07:42:58
你是不是菌种不对啊，建议你更换靠谱点的菌种（一定要靠谱）再做一批感受态试试。同时建议你转个PUC19看看长斑情况，如果还这样呢估计就是菌种不对了。
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脚踏实地：遇一个，学一个，会一个。。。
2楼2017-01-10 16:09:36
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upwardkl

新虫 (初入文坛)
谢谢你的应助，我们重复做过感受态了，长菌的情况也差不多，，，
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雪霁花开，向上追求
3楼2017-01-10 20:37:23
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amyz327

新虫 (小有名气)
这很正常啊，我一般放16个小时。可能感受态活性不好

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4楼2017-01-10 21:29:16
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